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ELISA試劑盒進口大鼠控制操作時間說明
更新時間:2017-06-16   點擊次數(shù):862次

ELISA試劑盒進口大鼠操作過程的控制:①嚴格按照試劑說明操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60 min。②加樣后及時放入孵箱。標本較多時,要分批操作。防止孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。③封板溫育時,各孔一定要封嚴,ELISA試劑盒防止陽性標本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導致“盎”灞的出現(xiàn)。④用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象。⑤合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。⑥加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。⑦顯色劑盡量在臨用前配制,不使用過期顯色劑,肉眼可見淺藍的TM顯色劑不用。⑧加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時要避免產(chǎn)生氣泡。⑨應保證酶標板清潔,整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以得到更準確、更可靠的實驗結(jié)果。加樣吸嘴的潔凈與否和吸量的準確性直接影響檢測結(jié)果。
由于吸嘴構(gòu)造特殊,導致清洗困難,加大了交叉污染的機會。建議用一次性吸嘴。加樣器也要經(jīng)常清洗,定期校準。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒進口大鼠板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出。 
溫浴影響。在建立ELISA試劑盒方法時做反應動力學研究。實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經(jīng)1~2 h,產(chǎn)物的生成可達。為避免蒸發(fā),板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔。反應板孔、反應板不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。溫育的溫度和時間應嚴格按規(guī)定控制,特別要注意邊緣位置。96孔酶標板結(jié)構(gòu)特別,易產(chǎn)生邊緣效應,抗原抗體結(jié)合及酶促反應對溫度有嚴格要求,酶標板周邊孔與內(nèi)部孔升降溫速率不同,造成周邊與內(nèi)部孔結(jié)果差異;干浴與水浴存在明顯的差異,盡可能使用水浴,ELISA試劑盒進口大鼠并要求固相板放入水中,減少受熱不均,貼密封膜,防止污物浸入。 

 

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